Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測試劑盒的原理與注意事項(xiàng)

Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測試劑盒是一款靈敏度高且能快速簡便地檢測細(xì)胞凋亡的產(chǎn)品。本試劑盒可通過流式細(xì)胞儀來進(jìn)行懸浮細(xì)胞、貼壁細(xì)胞的流式凋亡檢測。那么你知道Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測試劑盒的原理與注意事項(xiàng)是什么嗎？讓我們一起來看看吧！

一、檢測原理

細(xì)胞在發(fā)生凋亡時，會激活一些特異性的DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。使得凋亡細(xì)胞的DNA被切割成180~200bp片段，在瓊脂糖凝膠上通常以180~200bp 的階梯狀遷移。細(xì)胞經(jīng)過固定破膜后，TdT酶（脫氧核糖核酸末端轉(zhuǎn)移酶）將熒光標(biāo)記的dUTP 連接到細(xì)胞斷裂DNA 暴露的 3'-OH 末端，通過流式細(xì)胞儀檢測 dUTP偶聯(lián)物發(fā)出的熒光信號，從而來檢測晚期凋亡。

二、保存條件

-20°C 保存，保質(zhì)期一年。Labeling Solution 需避光保存，Labeling Solution、Fixation Buffer、Permeabilization Buffer需避免反復(fù)多次凍融，建議分裝保存。

三、注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用。

2. 請注意安全事項(xiàng)，遵守實(shí)驗(yàn)室試劑操作規(guī)范操作。

3. 用于該試劑盒的檢測樣本zui低細(xì)胞數(shù)目不低于 5×105個。

4. 實(shí)驗(yàn)中需要重懸細(xì)胞的步驟，用移液器輕輕吹打細(xì)胞 10~20次，吹打時請勿將槍頭中的液體wan全吹出，避免造成細(xì)胞損傷和產(chǎn)生過多的氣泡。

5. 離心去上清的操作要小心謹(jǐn)慎，避免造成細(xì)胞損失。

6. Labeling Solution和TdT Enzyme 應(yīng)避免反復(fù)凍融和渦旋操作。

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