流式細胞術(shù)的科研應(yīng)用有什么？

流式細胞術(shù)（FCM）是一種對處在快速流動中的細胞或其它生物微粒逐個進行多參數(shù)的快速定量分析和分選的技術(shù)。它集計算機技術(shù)、激光技術(shù)、流體力學(xué)、熒光標(biāo)記技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)、細胞免疫學(xué)于一體，按照細胞或生物顆粒的物理或化學(xué)性質(zhì)，同時具有分析和分選細胞或生物顆粒的功能。那么你知道流式細胞術(shù)的科研應(yīng)用有什么嗎？讓我們一起來看看吧！

一、細胞凋亡檢測

在正常細胞中，細胞膜上的磷脂酰絲氨酸（PS）位于胞漿側(cè)。細胞凋亡中期，PS 外翻。Annexin V 是一種 Ca2+ 依賴的對 PS 具有高度親和力的磷脂結(jié)合蛋白，因此可以用熒光標(biāo)記的 Annexin V 檢測 PS 的外翻。凋亡末期，細胞膜結(jié)構(gòu)受損，原本不透膜的核酸染料（如 PI、7-AAD 等）也能進入細胞，從而產(chǎn)生信號。分別檢測 Annexin V 和不透膜核酸染料的信號，可對凋亡中期和末期細胞的比例進行定量

二、細胞周期檢測

細胞核 DNA 含量隨著細胞增殖周期時相的不同而發(fā)生變化，用 DNA 染料進行染色，DNA 含量多，熒光信號強，DNA 含量少，熒光強度低。通過對細胞瞬間的快速測定，判斷細胞所處的細胞周期時相，并分析群體細胞中處于不同周期時相的細胞比例，以研究細胞的周期，DNA 復(fù)制和染色體倍性等。在腫瘤學(xué)研究中尤其常用，可以此來判斷藥物對腫瘤細胞影響、腫瘤的生長速度與患者預(yù)后等。

三、Th/Treg檢測

通過刺激阻斷劑對 T 細胞進行處理，通過檢測表面或胞內(nèi)標(biāo)志物進行分型檢測。

四、免疫分型檢測

利用細胞表面或細胞內(nèi)特異性抗體分子，分別選用不同標(biāo)記的流式抗體對細胞進行分型和分析。

利用抗原/抗體反應(yīng)原理，采用不同的流式抗體對樣本進行檢測可達到對不同細胞進行分型檢測的目的。

五、細胞因子檢測

采用 CBA 或液相芯片的方法將捕獲抗體和微球/液相芯片結(jié)合，檢測抗體和 SA-PE 結(jié)合通過抗原抗體特異性反應(yīng)達到多種細胞因子檢測的目的。

六、細胞分選

細胞分選利用流式細胞分選儀來分離純化細胞或顆粒以供進一步分析。

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