細胞實驗的常見問題有哪些？如何解決呢？

細胞培養做為生物學研究最基礎的技術之一，可以說是滲透科研界的方方面面。那么細胞實驗中的常見問題有哪些？應該如何解決呢？讓我們一起來看看吧！

一、如何選用細胞系培養基？

優先根據細胞來源公司提供的培養條件，。一般建議不要隨意更換培養基種類。細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養基，若驟然使用與原先提供的培養條件不同的培養基，可能造成細胞形態發生變化或無法存活，以及細胞的表型功能丟失。

二、細胞發生微生物污染時，應如何處理？

直接丟棄或更換，將未受污染的細胞轉移至其它培養箱，并用消毒劑消毒培養器皿和超凈臺以及二氧化碳培養箱。如發生真菌霉菌污染，需用紫外燈照射整個細胞間，從而消除可能產生的孢子。同時排除使用試劑的污染，包括培養基和血清，可以空培試驗。

三、為何培養基用一段時間后，顏色偏紫？

培養基隨著多次開蓋會使培養液 CO2 逐漸溢出，造成培養基越來越偏堿性從而變紫，尤其是剩余的培養基越少越容易變紫。可將培養瓶瓶蓋旋松放入二氧化碳培養箱校正溶液 PH 值，過一段時間就會變回正常。變紫的培養基是可以繼續使用的，培養細胞時在培養箱會自動恢復顏色。

四、細胞培養液變黃變渾，如何處理？

細胞培養液變黃多半是細胞密度過大，細胞增殖速度過快，產生大量酸性代謝廢物，導致細胞營養不足。而培養液變渾多半是發生了細菌污染。出現這種情況應立即進行消化傳代處理。

五、血清中出現的沉淀是什么，有影響嗎？

① 纖維蛋白，是經常出現的較大沉淀物，可達到 1～2 mm，用肉眼可觀察到；

② 膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質，是血清出現沉淀物的常見原因；

③ 磷酸鈣，也是一種常見沉淀物，通常會使血清出現渾濁，并且在 37 ℃ 培養時會增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點，這些小黑點由于布朗運動看上去可以活動，因此經常被誤認為是微生物污染。

這些沉淀對細胞的生長是沒有影響的，如想去除沉淀，盡量采用離心方法，不建議使用過濾方法，因為會堵塞濾膜而且會造成污染的風險。

六、細胞支原體污染如何處理？

支原體污染是比較難去除的，特別容易復發，一般建議直接更換新的細胞，如特別精貴或重要的細胞可嘗試使用四環素、大環內酯類抗生素（泰樂霉素）、喹諾酮類抗生素。

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