PCR/qPCR耗材選擇——顏色篇

         PCR管/板有多種顏色，如透明色、白色、黃色、藍(lán)色、紅色……普通的PCR過程中，管/板的顏色并不會影響PCR的結(jié)果，但是在qPCR中，管/板的顏色對于結(jié)果是有很大的影響的。

應(yīng)用于qPCR的耗材，一般是白色或者磨砂的塑料耗材。qPCR在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中，以熒光化學(xué)物質(zhì)測每次PCR循環(huán)后產(chǎn)物總量，因此與透明塑料管/板相比，白色或磨砂的管/板在應(yīng)對熒光時(shí)表現(xiàn)更為靈敏，并且結(jié)果更加準(zhǔn)確。這是因?yàn)榘咨暮牟目梢宰柚篃晒庹凵涑龉埽_(dá)到熒光折射的最小化，將更多的熒光信號反射回檢測器，從而增加信噪比，表現(xiàn)為更高的靈敏度；另外，白色管壁也可阻止熒光信號被PCR儀的加熱模塊吸收或進(jìn)一步反射，從而可以降低重復(fù)實(shí)驗(yàn)中的誤差，提高準(zhǔn)確性。除此之外，在進(jìn)行qPCR時(shí)需使用超透明的管蓋或光學(xué)密封膜來密封PCR管/板，保證熒光不受干擾；還需要參考qPCR的耗材要求，選擇最合適的耗材，達(dá)到優(yōu)的實(shí)驗(yàn)效果。